CEP152 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-430248

概要

Cep152 は、マウス細胞における中心小体形成（centriole biogenesis）および中心体複製に必須の中核スキャフォールドである中心体タンパク質 CEP152 をコードする。CEP152 は PLK4 などの中心小体組み立て因子と協調して、中心体周囲物質（pericentriolar material；PCM）のリクルートと組織化を担い、微小管の核形成と、分裂期における正確な両極性紡錘体形成を支える。CEP152 の機能が損なわれると細胞周期進行が乱れ、中心体の過剰増幅または喪失が引き起こされ、紡錘体形成や染色体分配の不全を介してゲノム不安定性が促進される。これらの過程により CEP152 は、発生生物学、神経新生、そして分裂の忠実性や DNA 損傷応答に関わるがん関連機構などで頻繁に検討される経路と結び付けられている。

CEP152 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCep152遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cep152内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cep152のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CEP152タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CEP152シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cep152欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CEP152の機能に不可欠なCep152エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cep152ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CEP152 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCEP152 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cep152遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CEP152 HDRプラスミド（m）および CEP152 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCep152ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCep152標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。