Centaurin α1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407463

概要

ADAP1はcentaurin α1をコードしており、これはプレクストリン相同（PH）ドメインを有するArf GTPase活性化タンパク質（Arf GAP）で、ホスホイノシチドシグナル伝達を膜輸送およびアクチン細胞骨格の再編成と結び付けます。Arf依存的なエンドサイトーシスおよび小胞輸送イベントを調節することで、centaurin α1はPI3Kによって産生される脂質の下流における受容体リサイクリングとシグナル伝播の協調に寄与します。本タンパク質は、組織の構築や細胞応答性の中核をなす細胞移動および接着ダイナミクスの制御との関連も示されています。ADAP1活性の変化は、輸送や細胞骨格制御の破綻が疾患関連の表現型（浸潤性の挙動や異常なシグナル伝達など）に寄与する状況において研究されてきました。

Centaurin α1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるADAP1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ADAP1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ADAP1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Centaurin α1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Centaurin α1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ADAP1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Centaurin α1の機能に不可欠なADAP1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ADAP1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Centaurin α1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCentaurin α1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ADAP1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Centaurin α1 HDRプラスミド（h）および Centaurin α1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはADAP1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のADAP1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。