CDKN2C/p18 INK4c CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401214

概要

CDKN2Cはp18 INK4cをコードしており、p18 INK4cはサイクリン依存性キナーゼ阻害因子であるINK4ファミリーの一員です。CDK4およびCDK6に結合して、サイクリンDによって駆動されるRBのリン酸化を抑制し、G1/Sチェックポイントを維持します。E2F依存的な転写プログラムを制限することで、CDKN2Cは複数の組織にわたり、細胞周期進行、系譜決定、ならびに細胞の静止状態（クワイエッセンス）の制御に寄与します。CDKN2C機能の攪乱は、CDK4/6–RBシグナル伝達の異常、ゲノム不安定性、そしてがん生物学に関連する増殖性表現型の文脈でしばしば研究されます。CDKN2Cはまた、腫瘍性ストレスのモデルにおいて、増殖シグナルからの入力とチェックポイントの健全性とを結び付ける機構的な結節点としても用いられます。

CDKN2C/p18 INK4c CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCDKN2C遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CDKN2C内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CDKN2Cのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CDKN2C/p18 INK4cタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CDKN2C/p18 INK4cシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CDKN2C欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CDKN2C/p18 INK4cの機能に不可欠なCDKN2Cエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CDKN2Cゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CDKN2C/p18 INK4c CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCDKN2C/p18 INK4c CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CDKN2C遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CDKN2C/p18 INK4c HDRプラスミド（h）および CDKN2C/p18 INK4c HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCDKN2Cホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCDKN2C標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。