Cdk9 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400242-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Cdk9O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Cdk9 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Cdk9 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CDK9. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Cdk9 Anticorpo (D-7): sc-13130
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Cdk9 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400242-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cdk9 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400242-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDK9 codifica a subunidade catalítica do fator b de alongamento positivo da transcrição (P-TEFb), um complexo quinase que fosforila o domínio C-terminal da RNA polimerase II e fatores de pausa para promover o alongamento transcricional produtivo. Por meio do controle da liberação da pausa próximo ao promotor, a Cdk9 regula programas gênicos de resposta rápida, a progressão do ciclo celular e a transcrição adaptativa ao estresse, integrando-se à sinalização dependente de ciclina T e a redes regulatórias associadas à cromatina. A atividade ou dependência desregulada de CDK9 tem sido associada a alterações na homeostase transcricional no câncer e a perturbações em circuitos transcricionais inflamatórios e virais, tornando-a um nó central para o estudo de mecanismos de controle da transcrição.
Cdk9 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CDK9 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CDK9. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CDK9. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CDK9 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.