CD40 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400524-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD40O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CD40 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CD40 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CD40. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD40 Anticorpo (H-10): sc-13128
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD40 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400524-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD40 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400524-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD40 codifica um membro da superfamília de receptores de TNF expresso em células apresentadoras de antígeno, incluindo células B, células dendríticas e macrófagos, onde integra sinais coestimuladores que moldam a imunidade adaptativa. A ligação ao CD40 ativa as vias canônica e não canônica de sinalização de NF-κB, cascatas de MAPK e programas dependentes de PI3K que promovem sobrevivência celular, produção de citocinas, apresentação de antígeno e recombinação de troca de classe em células B. A sinalização CD40–CD40L é central para a formação de centros germinativos e para respostas humorais dependentes de células T, e sua desregulação tem sido associada a imunodeficiência, inflamação crônica e à biologia de neoplasias de células B. Como um receptor imunorregulador nodal, o CD40 é frequentemente estudado em vias que controlam a maturação de APCs, o priming de células T e redes transcricionais inflamatórias.
CD40 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CD40 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CD40. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CD40. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CD40 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.