CD362/SDC2/Syndecan-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-420985

概要

Sdc2は、膜貫通型のヘパラン硫酸プロテオグリカンであるシンデカン-2（CD362/SDC2）をコードしており、細胞外マトリックス成分やヘパリン結合性増殖因子の共受容体として機能します。細胞表面のプロテオグリカンとリガンドの相互作用を組織化することで、SDC2は細胞接着、遊走、細胞骨格の再構築を制御し、FGF、VEGF、Wnt、インテグリン/FAK–SRCネットワークなどの経路を介したシグナル伝達にも影響を与えます。マウス系では、Sdc2は間質—上皮間コミュニケーション、血管新生応答、発生や損傷モデルにおける組織リモデリングの研究に用いられてきました。SDC2の発現量や糖鎖修飾の変化は、線維化や腫瘍微小環境の生物学といった文脈でも検討されており、マトリックス依存的なシグナルが増殖や浸潤性を調節し得ることが示されています。

CD362/SDC2/Syndecan-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSdc2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Sdc2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Sdc2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CD362/SDC2/Syndecan-2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CD362/SDC2/Syndecan-2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Sdc2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CD362/SDC2/Syndecan-2の機能に不可欠なSdc2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Sdc2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CD362/SDC2/Syndecan-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCD362/SDC2/Syndecan-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Sdc2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CD362/SDC2/Syndecan-2 HDRプラスミド（m）および CD362/SDC2/Syndecan-2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSdc2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSdc2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。