CD36 CRISPR Activationプラスミド (h): sc-400233-ACT

ヒトCD36は、多機能なスカベンジャー受容体をコードしており、長鎖脂肪酸および酸化リポタンパク質の取り込みを仲介し、脂質の取り扱いを細胞の代謝状態と協調させます。CD36は脂質輸送・貯蔵プログラムに関与するとともに、マクロファージ活性化や泡沫細胞形成に関連する過程を含む炎症シグナル伝達とも接点を持ちます。内皮細胞、脂肪細胞、免疫細胞の生物学における役割を通じて、CD36は動脈硬化、代謝異常、慢性炎症の基盤となる経路の研究で頻繁に取り上げられています。CD36活性の変化は、がん細胞の代謝や腫瘍微小環境においても検討されており、脂質利用が増殖や免疫表現型に影響し得ることが示唆されています。

CD36 CRISPR活性化プラスミド（h）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性CD36の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。

CD36 CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における CD36 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。

標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はCD36転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性CD36の発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のCD36遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるCD36依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびCD36発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるCD36経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。