Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CD20 Plasmide Double Nickase (h): sc-416765-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CD20 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CD20 Double Nickase Plasmid (h) e il CD20 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MS4A1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CD20 Antibody (D-10): sc-393894
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CD20 Plasmide Double Nickase (h) | sc-416765-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD20 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-416765-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MS4A1 codifica CD20, una proteina di membrana tetraspanning espressa selettivamente nei linfociti B, che contribuisce all’attivazione, proliferazione e differenziazione delle cellule B. CD20 è coinvolta nella regolazione del flusso di Ca2+ e nell’organizzazione di microdomini di membrana che coordinano la segnalazione del recettore delle cellule B e le vie a valle come PI3K/AKT, NF-κB e MAPK. L’espressione di CD20 definisce fasi chiave dello sviluppo dei linfociti B ed è ampiamente utilizzata come marcatore di linea in immunologia. La deregolazione della segnalazione delle cellule B e le alterazioni dell’espressione di MS4A1 sono rilevanti negli studi sull’infiammazione autoimmune e sulla biologia delle malattie ematologiche guidate dalle cellule B.
CD20 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MS4A1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MS4A1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MS4A1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MS4A1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.