CD19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419534

概要

マウスCd19はCD19をコードしており、CD19はB細胞に特異的に発現する細胞表面共受容体である。CD19はキナーゼやアダプタータンパク質をリクルートすることでB細胞受容体（BCR）複合体からのシグナル伝達を増幅し、下流のPI3K/AKT経路およびMAPK経路の活性を協調的に制御する。活性化閾値、カルシウムフラックス、増殖、生存を調整することにより、CD19は胚中心反応と有効な体液性免疫に寄与する。CD19依存的なシグナルの変化やB細胞分化状態は、免疫学および血液疾患モデルにおける機序解析の指標として広く用いられており、異常なB細胞活性化や系譜アイデンティティに関する研究にも利用されている。

CD19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCd19遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cd19内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cd19のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CD19タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CD19シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cd19欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CD19の機能に不可欠なCd19エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cd19ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CD19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCD19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cd19遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CD19 HDRプラスミド（m）および CD19 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCd19ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCd19標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。