CD10 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400856-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD10O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CD10 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CD10 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MME. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD10 Anticorpo (F-4): sc-46656
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD10 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400856-NIC | 20 µg | $410.00 |
MME codifica o CD10 (neprilisina), uma metaloendopeptidase de membrana dependente de zinco que regula o ambiente extracelular de peptídeos ao clivar diversos substratos bioativos, incluindo encefalinas, peptídeos natriuréticos e peptídeos relacionados à endotelina. Ao modular a disponibilidade de ligantes e a amplitude da sinalização por receptores, o CD10 influencia vias ligadas à comunicação célula–célula, ao tônus inflamatório e à remodelação tecidual em compartimentos epiteliais e hematopoéticos. O CD10 é amplamente utilizado como marcador de linhagem e de diferenciação, e seu estado de expressão é frequentemente investigado em estudos de programas de desenvolvimento e de fenótipos associados a tumores, nos quais o processamento proteolítico alterado pode remodelar a sinalização do microambiente. A perturbação funcional de MME oferece uma abordagem acessível para dissecar redes de metabolismo de peptídeos e respostas transcricionais a jusante em modelos celulares humanos.
CD10 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MME em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MME. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MME. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MME interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.