Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CBS Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400877-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CBSO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CBS (h) e o Plasmídeo Double Nickase CBS (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CBS. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CBS Anticorpo (B-4): sc-133154
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CBS Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400877-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CBS Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400877-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A CBS humana (cistationina β-sintase) é uma enzima dependente de fosfato de piridoxal que catalisa a primeira etapa comprometida da via de transsulfuração, convertendo homocisteína e serina em cistationina e conectando o metabolismo de um carbono à biossíntese de cisteína e glutationa. Ao regular a depuração de homocisteína e a capacidade de tamponamento redox, a CBS influencia o potencial de metilação, as respostas ao estresse oxidativo e, de forma mais ampla, o metabolismo de aminoácidos sulfurados. A atividade da CBS também contribui para a produção endógena de sulfeto de hidrogênio, uma molécula sinalizadora implicada na função mitocondrial e na adaptação celular ao estresse. A desregulação da CBS está associada a alterações na homeostase da homocisteína e tem sido estudada em contextos que incluem erros inatos do metabolismo e fenótipos neurovasculares e inflamatórios relevantes para a pesquisa básica.
CBS O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CBS em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CBS. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CBS. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CBS interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.