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Cbl双切口酶质粒(h) | sc-400561-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cbl双切口酶质粒(h2) | sc-400561-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CBL 编码 Cbl 蛋白,它是一种 E3 泛素连接酶和衔接蛋白,负责协调对已激活的受体型与非受体型酪氨酸激酶的下调调控。Cbl 通过其 TKB 结构域以及依赖 RING finger 的泛素化活性,促进信号复合物的泛素介导转运与降解,从而塑造 EGFR/RTK、MAPK/ERK、PI3K–AKT 以及免疫受体信号等通路的输出。Cbl 还参与内吞作用、蛋白质质量控制,并通过反馈调节来控制信号转导强度与持续时间。CBL 的失调或突变与异常的酪氨酸激酶信号及血液系统疾病的生物学相关,因此它是研究致癌信号网络与免疫细胞调控回路的一个重要节点。
Cbl 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CBL 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CBL内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CBL的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CBL基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。