CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h2): sc-400648-KO-2

概要

CNR1はカンナビノイド受容体1（CB1）をコードしており、主に神経細胞に発現するGタンパク質共役型受容体（GPCR）として、エンドカンナビノイドのシグナルを伝達し、神経伝達物質の放出やシナプス可塑性を調節します。CB1は主にGi/oタンパク質と共役してアデニリルシクラーゼを抑制し、cAMP/PKAシグナルを調節するとともに、MAPK/ERK経路を活性化し、イオンチャネル活性やシナプス前終末のカルシウム動態にも影響を与えます。これらの機構を通じて、CB1は報酬系、侵害受容（痛み）、食欲、ストレス応答、神経炎症といった機能の回路レベルでの制御に寄与します。CNR1シグナルの破綻は神経精神疾患様の表現型や代謝形質と関連づけられており、脳—身体間シグナリングや恒常性制御を研究するための分子学的ハブとしての有用性を支持しています。

CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）は、human細胞株におけるCNR1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CNR1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CNR1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CNR1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1の機能に不可欠なCNR1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CNR1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CNR1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 HDRプラスミド（h）および CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCNR1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCNR1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。