Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
caveolin-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419481
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- caveolin-3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico caveolin-3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:caveolin-3 Anticorpo (A-3): sc-5310
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
caveolin-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419481 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Cav3 de camundongo codifica a caveolina-3, uma proteína de ancoragem (scaffolding) das cavéolas enriquecida em músculo, que organiza microdomínios de membrana e coordena a sinalização no sarcolema. A caveolina-3 modula processos como mecanotransdução, tráfego vesicular e localização de canais iônicos, influenciando vias como a sinalização PI3K–AKT e a regulação do óxido nítrico no músculo estriado. Alterações na função de CAV3 estão associadas à instabilidade de membrana e à desregulação da homeostase de sinalização no músculo esquelético e cardíaco, reforçando sua relevância para modelos de miopatia e cardiomiopatia. Assim, Cav3 é amplamente utilizado para estudar o controle, dependente de cavéolas, da fisiologia muscular, do reparo de membrana e da compartimentalização de sinais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO caveolin-3 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cav3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cav3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cav3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína caveolin-3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cav3 para a investigação da sinalização de caveolin-3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cav3 críticos para a função caveolin-3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cav3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo caveolin-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo caveolin-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cav3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo caveolin-3 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR caveolin-3 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cav3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cav3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.