Plasmide Double Nickase (m) caveolin-1: sc-419479-NIC

Le gène murin **Cav1** code la **cavéoline‑1**, un composant structural majeur des **cavéoles**, qui sert d’échafaudage à des microdomaines membranaires et coordonne la transduction des signaux à la membrane plasmique. La cavéoline‑1 module l’endocytose et la mécanotransduction, influence l’homéostasie du cholestérol et le trafic lipidique, et façonne les réponses de signalisation de voies telles que les kinases de la famille Src, la signalisation eNOS/NO, TGF‑β et la dynamique des adhérences focales dépendantes des intégrines. Par ces fonctions, **Cav1** impacte le remodelage du cytosquelette, la migration cellulaire et les interactions avec la matrice extracellulaire, fréquemment étudiés en biologie vasculaire, dans des modèles de fibrose et dans des travaux sur le microenvironnement tumoral. Des altérations de l’expression ou de la localisation de la cavéoline‑1 ont été associées à une dysrégulation de la fonction endothéliale, à des phénotypes adiposités et métaboliques, ainsi qu’à des modifications dépendantes du contexte de la prolifération et de l’invasion dans des cadres de recherche en cancérologie.

caveolin-1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Cav1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Cav1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Cav1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Cav1.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.