Plasmide Double Nickase (h) casein kinase IIα′: sc-401148-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) casein kinase IIα′ correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide casein kinase IIα′ Double Nickase (h) et le plasmide casein kinase IIα′ Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CSNK2A2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) casein kinase IIα′ | sc-401148-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) casein kinase IIα′ | sc-401148-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CSNK2A2 code la sous-unité catalytique alpha′ de la caséine kinase II, une sérine/thréonine kinase constitutivement active qui s’associe à des sous-unités bêta régulatrices pour former l’holoenzyme CK2. CK2 phosphoryle un large éventail de substrats impliqués dans la progression du cycle cellulaire, la signalisation des dommages à l’ADN, la régulation de la chromatine et la biogenèse des ribosomes, et elle interagit avec des voies telles que Wnt/β-caténine, NF-κB et PI3K/AKT afin d’ajuster la prolifération et les réponses au stress. Par ces fonctions, CSNK2A2 contribue au maintien de la protéostasie et de programmes transcriptionnels fréquemment dérégulés dans le cancer et d’autres troubles caractérisés par des réseaux de phosphorylation altérés. La perturbation de l’activité de CK2 est également utilisée pour étudier, dans divers modèles de cellules humaines, le contrôle de l’apoptose, de la différenciation et de la signalisation inflammatoire dépendant des kinases.
casein kinase IIα′ Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CSNK2A2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CSNK2A2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CSNK2A2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CSNK2A2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.