casein kinase Iγ3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406678

Visão geral

CSNK1G3 codifica a caseína quinase I gama 3 (CK1γ3), uma proteína quinase de serina/treonina associada à membrana, da família CK1, que fosforila diversos substratos para modular a transdução de sinal, o turnover proteico e o tráfego subcelular. As isoformas de CK1 comumente se conectam a vias como a sinalização Wnt/β-catenina, o controle circadiano e do ciclo celular e eventos de fosforilação próximos a receptores que influenciam a endocitose e a organização do citoesqueleto. Por meio dessas funções, a atividade de CSNK1G3 pode afetar checkpoints dependentes de fosforilação, a degradação mediada por ubiquitina e a dinâmica de sinalização responsiva a estímulos. Sinalização quinase desregulada e redes de fosforilação alteradas são frequentemente associadas a fenótipos proliferativos e neurobiológicos, sustentando a investigação de CSNK1G3 em modelos celulares relevantes para doenças, sem implicar desfechos clínicos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO casein kinase Iγ3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CSNK1G3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CSNK1G3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CSNK1G3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína casein kinase Iγ3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CSNK1G3 para a investigação da sinalização de casein kinase Iγ3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CSNK1G3 críticos para a função casein kinase Iγ3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CSNK1G3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo casein kinase Iγ3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo casein kinase Iγ3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CSNK1G3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo casein kinase Iγ3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR casein kinase Iγ3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CSNK1G3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CSNK1G3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.