casein kinase Iγ3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406678
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- casein kinase Iγ3 Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im casein kinase Iγ3-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
casein kinase Iγ3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) | sc-406678 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
CSNK1G3 kodiert Casein-Kinase I Gamma 3 (CK1γ3), eine membranassoziierte Serin/Threonin-Proteinkinase aus der CK1-Familie, die unterschiedliche Substrate phosphoryliert und dadurch Signaltransduktion, Proteinumsatz und subzellulären Transport mitprägt. CK1-Isoformen sind häufig in Signalwegen wie der Wnt/β-Catenin-Signalübertragung, der zirkadianen und Zellzyklus-Kontrolle sowie in rezeptornahen Phosphorylierungsereignissen eingebunden, die Endozytose und Zytoskelettorganisation beeinflussen. Über diese Funktionen kann die Aktivität von CSNK1G3 phosphorylierungsabhängige Checkpoints, ubiquitinvermittelten Abbau und die Dynamik stimulusabhängiger Signalprozesse beeinflussen. Fehlregulierte Kinase-Signale und veränderte Phosphorylierungsnetzwerke sind oft mit proliferativen und neurobiologischen Phänotypen verknüpft, was die Untersuchung von CSNK1G3 in krankheitsrelevanten Zellmodellen unterstützt, ohne klinische Ergebnisse zu implizieren.
Das casein kinase Iγ3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des CSNK1G3-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des CSNK1G3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von CSNK1G3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die casein kinase Iγ3-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von CSNK1G3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der casein kinase Iγ3-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf CSNK1G3-Exone abzielen, die für die casein kinase Iγ3-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere CSNK1G3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom casein kinase Iγ3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom casein kinase Iγ3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des CSNK1G3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das casein kinase Iγ3 HDR-Plasmid (h) und casein kinase Iγ3 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von CSNK1G3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten CSNK1G3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.