Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
casein kinase Iδ Double Nickaseプラスミド (h): sc-401839-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- casein kinase Iδ Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- casein kinase Iδダブルニカースプラスミド（h）およびcasein kinase Iδダブルニカースプラスミド（h2）は、CSNK1Dを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: casein kinase Iδ 抗体 (C-8): sc-55553
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
casein kinase Iδ Double Nickaseプラスミド (h) | sc-401839-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
casein kinase Iδ Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-401839-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CSNK1Dは、カゼインキナーゼIδ（casein kinase Iδ）をコードするセリン／スレオニンキナーゼであり、多様な基質をリン酸化することで、概日時計のタイミング、小胞輸送、細胞骨格の構築を協調的に制御します。また、Wnt/β-カテニン、Hedgehog、DNA損傷応答経路にまたがるシグナル統合に関与し、制御されたリン酸化を介してタンパク質の安定性や細胞内局在に影響を与えます。CSNK1D活性の破綻は、概日リズム表現型の変化や、がん化および神経生物学的過程に関連する異常なシグナル伝達プログラムと結び付けられており、経路解析に有用なノードとなります。研究では、CSNK1Dの摂動を用いて、キナーゼ依存的な転写リズム制御、有糸分裂の進行、リン酸化制御型のタンパク質ターンオーバーを解明することが一般的です。
casein kinase Iδ ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における CSNK1D 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、CSNK1D内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、CSNK1Dの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、CSNK1Dが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。