Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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casein kinase Iδ Double Nickase Plasmid (h): sc-401839-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das casein kinase Iδ Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- casein kinase Iδ Double-Nickase-Plasmid (h) und casein kinase Iδ Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CSNK1D abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: casein kinase Iδ: sc-55553
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
casein kinase Iδ Double Nickase Plasmid (h) | sc-401839-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
casein kinase Iδ Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401839-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CSNK1D kodiert die Casein-Kinase Iδ, eine Serin/Threonin-Kinase, die vielfältige Substrate phosphoryliert, um das Timing der zirkadianen Uhr, den Vesikeltransport und die Organisation des Zytoskeletts zu koordinieren. Sie trägt zur Signalintegration in Wnt/β‑Catenin-, Hedgehog- und DNA-schadensresponsiven Signalwegen bei und beeinflusst über regulierte Phosphorylierung die Proteinstabilität und subzelluläre Lokalisation. Eine Fehlregulation der CSNK1D-Aktivität wurde mit veränderten zirkadianen Phänotypen und aberranten Signalprogrammen in Verbindung gebracht, die für onkogene und neurobiologische Prozesse relevant sind, wodurch CSNK1D einen nützlichen Knotenpunkt zur Untersuchung von Signalwegen darstellt. Studien nutzen häufig gezielte Eingriffe in CSNK1D, um die kinaseabhängige Kontrolle transkriptioneller Rhythmen, des mitotischen Fortschritts und des phosphoregulierten Proteinabbaus zu analysieren.
casein kinase Iδ Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CSNK1D-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CSNK1D abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CSNK1D-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CSNK1D-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.