Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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CARD 9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402214
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CARD 9 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CARD 9, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CARD 9 Anticorpo (A-8): sc-374569
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CARD 9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402214 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O membro 9 da família do domínio de recrutamento de caspase (CARD9) é uma proteína adaptadora expressa predominantemente em células mieloides, que conecta receptores de reconhecimento de padrões a vias inflamatórias de sinalização a jusante. Atua no complexo CARD9–BCL10–MALT1 para promover a ativação das vias NF-κB e MAPK após o reconhecimento de componentes fúngicos e bacterianos por meio de receptores de lectina do tipo C, como o Dectin-1, modulando a produção de citocinas e a polarização da imunidade inata. O CARD9 também influencia respostas relacionadas ao inflamassoma e a defesa do hospedeiro em barreiras mucosas ao coordenar programas efetores antimicrobianos. Variações genéticas ou alterações na sinalização de CARD9 têm sido associadas à suscetibilidade a infecções fúngicas invasivas e a fenótipos inflamatórios, sustentando seu uso como um nó mecanístico em pesquisas de imunologia e focadas no microbioma.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CARD 9 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CARD9 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CARD9, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CARD9 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CARD 9.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CARD9 para a investigação da sinalização de CARD 9, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CARD9 críticos para a função CARD 9
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CARD9 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CARD 9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CARD 9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CARD9. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CARD 9 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CARD 9 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CARD9 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CARD9 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.