CaMKV CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-433479

概要

Camkv は CaMKV をコードしており、CaMKV はニューロンに豊富に存在する非典型的なカルモジュリン依存性プロテインキナーゼ様タンパク質で、活動依存的シグナル伝達に関与するとされています。正統的な CaMK と比べて触媒活性が限定的、あるいは非典型的であると報告されている一方で、CaMKV は Ca2+/カルモジュリンに連動した制御ネットワークの一部として、シナプスシグナル伝達、細胞骨格の構築、神経分化に影響を与えます。これらの過程を通じて Camkv は神経突起の伸長や可塑性を制御する経路と関連づけられており、神経系の発達や機能障害の機序研究において重要な対象となります。CaMKV のような Ca2+ 応答性シグナルの要所（ノード）の制御異常は、モデル系における神経発達・神経精神疾患様表現型の文脈でしばしば検討されます。

CaMKV CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCamkv遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Camkv内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Camkvのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CaMKVタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CaMKVシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Camkv欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CaMKVの機能に不可欠なCamkvエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Camkvゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CaMKV CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCaMKV CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Camkv遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CaMKV HDRプラスミド（m）および CaMKV HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCamkvホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCamkv標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。