cadherin-26 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-401989

Panoramica

CDH26 codifica la caderina-26, una molecola di adesione cellula–cellula calcio-dipendente appartenente alla superfamiglia delle caderine, che contribuisce a regolare l’architettura epiteliale e l’organizzazione delle giunzioni intercellulari. Influenzando la dinamica dell’adesione e le proprietà di barriera dei tessuti, la caderina-26 può modulare processi quali la differenziazione epiteliale, la segnalazione dipendente dal contatto e la migrazione cellulare. Un’alterata espressione di CDH26 è stata riportata in contesti di infiammazione delle mucose, a supporto della sua rilevanza per lo studio delle interazioni epitelio–sistema immunitario e della fisiopatologia associata alla barriera.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO cadherin-26 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene CDH26 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del CDH26 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto CDH26 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina cadherin-26.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di CDH26 per lo studio della segnalazione di cadherin-26, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni CDH26 critici per la funzione di cadherin-26
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di CDH26 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal cadherin-26 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal cadherin-26 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus CDH26. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal cadherin-26 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR cadherin-26 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia CDH26 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio CDH26 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.