CRISPRデータではありません：画像はCRISPR実験結果を可視化するための抗体の品質を示しています。
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C1s Double Nickaseプラスミド (h): sc-404794-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- C1s Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- C1sダブルニカースプラスミド（h）およびC1sダブルニカースプラスミド（h2）は、C1Sを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: C1s 抗体 (D-6): sc-365273
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
C1s Double Nickaseプラスミド (h) | sc-404794-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
C1s Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-404794-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
C1S は補体成分 C1s をコードしており、C1 複合体内で機能して古典的補体経路を開始する、モジュール構造をもつセリンプロテアーゼである。活性化されると C1s は C4 と C2 を切断して C3 コンバターゼを生成し、免疫複合体の認識を下流のオプソニン化および炎症性シグナル伝達へと結び付ける。C1s の活性は、プロテアーゼカスケード、細胞外タンパク質のプロセシング、自然免疫の制御とも交差し、サイトカイン応答やアポトーシス由来物質のクリアランスに影響を与える。古典的補体活性化の制御異常や C1S に影響する遺伝的バリアントは、免疫介在性炎症、反復感染への易感染性、補体駆動性の組織障害表現型と関連づけられており、免疫学および血管生物学研究における重要性を支持している。
C1s ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における C1S 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、C1S内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、C1Sの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、C1Sが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。