c-Maf CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421531

概要

Mafは、免疫組織および内分泌組織における系譜特異的な遺伝子発現プログラムを制御する、塩基性ロイシンジッパー型転写因子c-Mafをコードしています。マウスでは、c-MafはT細胞の分化とサイトカイン発現を規定する主要因子であり、ヘルパーT細胞の極性化やマクロファージ応答を形作る転写ネットワークに寄与するとともに、水晶体および膵島における遺伝子制御にも関与します。c-MafはMAPK経路やサイトカイン活性化経路からのシグナルを統合し、標的遺伝子座におけるクロマチンアクセシビリティやプロモーター／エンハンサー活性を調節します。MAF活性の制御異常は、免疫介在性炎症や血液悪性腫瘍における腫瘍性の転写状態と関連づけられており、経路解析や疾患モデル研究における機序解明の要所（メカニスティックノード）としての活用が支持されています。

c-Maf CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるMaf遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Maf内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Mafのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、c-Mafタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、c-Mafシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Maf欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• c-Mafの機能に不可欠なMafエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Mafゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• c-Maf CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびc-Maf CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Maf遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  c-Maf HDRプラスミド（m）および c-Maf HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMafホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMaf標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。