c-Maf Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-410543-KO-2
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- c-Maf O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico c-Maf, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:c-Maf Anticorpo (6B8): sc-293420
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
c-Maf Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-410543-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
MAF codifica o c-Maf, um fator de transcrição do tipo zíper de leucina básico (bZIP) que se liga a elementos de reconhecimento Maf para regular programas de expressão gênica dependentes do contexto. Em células humanas, o c-Maf integra sinais de diferenciação e de resposta ao estresse, influenciando a especificação de linhagem, a transcrição de genes de citocinas e de matriz extracelular e a coordenação de vias de ciclo celular e de sobrevivência. A atividade do c-Maf interage com redes de sinalização imune e circuitos transcricionais do desenvolvimento, modulando estados funcionais de macrófagos e células T, bem como a homeostase tecidual. A desregulação da expressão de MAF ou alterações na saída transcricional do c-Maf estão associadas a fenótipos aberrantes de diferenciação e proliferação observados em diversos contextos de pesquisa relevantes para doenças, incluindo modelos de malignidades hematológicas e estudos em biologia da inflamação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO c-Maf (h2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MAF em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MAF, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MAF na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína c-Maf.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MAF para a investigação da sinalização de c-Maf, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MAF críticos para a função c-Maf
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MAF para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo c-Maf Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo c-Maf Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MAF. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo c-Maf Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR c-Maf (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MAF para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MAF definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.