c-Fgr Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m): sc-420347-LAC
- alvos específicos: mouse
- 200 µl de alto titulo de partículas de ativação lentiviral CRISPR/dCas9 prontas para a transdução of transduction-ready
- c-Fgr as Partículas de Ativação Lentiviral (m) agem como um sistema de ativação de transcrição sinergética ao mediador de ativação (SAM, que foi criado para regular positivamente com especificidade e eficiência a expressão genética via transdução celular com lentivirus
- c-Fgr As partículas de ativação lentivirais (m) contem os seguintes elementos de ativação SAM:uma nuclease Cas9 (dCas9) desativada (D10A and N863A) ligadas a um domínio de transactivacao VP64, uma proteína de fusão MS2-p65-HSF1 e um alvo-especifico de RNA guia de 20 nt guia RNA. Ainda, as partículas contem genes de resistência a blasticidina, higromicina e puromicina
- Durante a transdução, o complexo SAM se liga a uma região especifica de aproximadamente 200-250 nt upstream da região de inicia da transcrição e assegura um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética
- Os gRNAs codificados pelo c-Fgr Plasmídeo de Ativação Lentiviral (m) e pelo c-Fgr Plasmídeo de Ativação Lentiviral (m2) têm como alvo regiões reguladoras distintas do promotor Fgr. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo: c-Fgr Anticorpo (D-6): sc-74542
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
c-Fgr Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m) | sc-420347-LAC | 200 µl | $455.00 |
O gene Fgr de camundongo codifica a c-Fgr, uma quinase de tirosina não receptora da família Src, enriquecida em linhagens mieloides, que acopla a sinalização de imunorreceptores e integrinas a eventos de fosforilação a jusante. A c-Fgr participa de vias que controlam a adesão de leucócitos, quimiotaxia, degranulação e respostas fagocíticas, integrando sinais de citocinas e de receptores de reconhecimento de padrões para moldar programas inflamatórios. Por meio da regulação da dinâmica do citoesqueleto e de nós de sinalização ligados a MAPK/PI3K, a Fgr influencia a ativação de células da imunidade inata e a infiltração tecidual. A atividade desregulada de quinases da família Src, incluindo alterações na sinalização de Fgr, está implicada em mecanismos de doenças inflamatórias e em redes de sinalização relevantes para neoplasias hematopoéticas, tornando a Fgr um alvo útil para estudos mecanísticos em imunologia.
As Partículas de Ativação Lentivirais c-Fgr (m) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de Fgr numa gama mais ampla de tipos de células humanas.
As Partículas de Ativação Lentivirais c-Fgr (m) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição Fgr, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de c-Fgr. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo Fgr e a arquitetura reguladora.
O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.