c-Abl Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418935

Visão geral

O gene Abl1 de camundongo codifica a tirosina-quinase não receptora c-Abl, uma proteína de sinalização multifuncional que integra sinais de receptores de fatores de crescimento, integrinas e estresse genotóxico para regular a proliferação, a remodelação do citoesqueleto, a adesão e a apoptose. A atividade de c-Abl influencia vias que controlam a dinâmica da actina e a renovação de adesões focais, e também participa da sinalização da resposta a danos no DNA por meio de interações proteicas dependentes de fosforilação no núcleo. A desregulação da sinalização de Abl1 e alterações na atividade quinase de c-Abl são amplamente relevantes para a transformação oncogênica e para programas aberrantes de sobrevivência celular, tornando Abl1 um nó-chave para o estudo de redes de sinalização dirigidas por quinases. Em modelos murinos, a perturbação de Abl1 permite a investigação mecanística do desenvolvimento, da função de células imunes e de fenótipos de resposta ao estresse ligados à sinalização por tirosina-quinases.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO c-Abl (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Abl1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Abl1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Abl1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína c-Abl.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Abl1 para a investigação da sinalização de c-Abl, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Abl1 críticos para a função c-Abl
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Abl1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo c-Abl Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo c-Abl Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Abl1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo c-Abl Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR c-Abl (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Abl1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Abl1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.