bradykinin 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-402422-NIC

인간 KNG1 유전자는 고분자량 키니노겐(high molecular weight kininogen)을 암호화하며, 이는 접촉계(contact system)가 활성화될 때 브래디키닌 생성의 전구체로 작용하는 다기능성 혈장 단백질이다. 칼리크레인에 의한 브래디키닌의 단백질분해적 방출은 브래디키닌 수용체를 활성화하여 혈관 긴장, 내피 투과성, 통증 신호 전달, 염증 매개체 생성 등을 조절하며, 이로써 KNG1은 칼리크레인–키닌계 내에서 응고–염증 상호작용의 연결고리로 기능한다. KNG1의 활성은 제XII인자, 프리칼리크레인, 그리고 내피 표면 결합 파트너들과의 상호작용을 통해 내인성 응고 및 보체 관련 과정과도 연계된다. 브래디키닌 생성 또는 신호 전달의 이상 조절은 부종이 쉽게 발생하는 염증 상태와 혈관 기능장애에 관여하는 것으로 알려져 있어, KNG1은 혈장 프로테아제 연쇄반응의 기전 연구에서 중요한 표적으로 간주된다.

bradykinin 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 KNG1 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 KNG1 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 KNG1의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, KNG1 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.