Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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BPGM Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405810
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BPGM O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico BPGM, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BPGM Anticorpo (C-4): sc-373819
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BPGM Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405810 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A mutase de bisfosfoglicerato (BPGM) é uma enzima enriquecida na linhagem eritroide que regula os níveis de 2,3-bisfosfoglicerato (2,3-BPG), um importante efetor alostérico da afinidade da hemoglobina pelo oxigênio. Ao interconverter 1,3-bisfosfoglicerato e 2,3-BPG, a BPGM conecta o fluxo glicolítico à fisiologia da entrega de oxigênio e à homeostase metabólica das hemácias. Alterações na atividade da BPGM podem deslocar as concentrações de 2,3-BPG e modular a oxigenação tecidual, tornando-a relevante para estudos do metabolismo eritrocitário, da adaptação à hipóxia e de fenótipos hematológicos. Como o 2,3-BPG afeta a função da hemoglobina sem alterar a abundância de hemoglobina, a BPGM é frequentemente usada para dissecar pontos de controle metabólicos que influenciam a dinâmica de ligação ao oxigênio.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO BPGM (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene BPGM em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do BPGM, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do BPGM na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína BPGM.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de BPGM para a investigação da sinalização de BPGM, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) BPGM críticos para a função BPGM
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos BPGM para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo BPGM Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo BPGM Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus BPGM. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo BPGM Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR BPGM (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia BPGM para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo BPGM definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.