BMP-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419346

概要

Bmp7は骨形成タンパク質7（BMP-7）をコードしており、分泌型のTGF-βスーパーファミリーリガンドとしてI型／II型BMP受容体を介してシグナルを伝達し、SMAD1/5/9を活性化して形態形成および組織恒常性を制御する転写プログラムを統合的に調節します。マウスの発生過程では、BMP-7は器官形成とパターニングに寄与し、腎臓・眼・骨格の形成で重要な役割を担うほか、上皮—間葉相互作用や細胞外マトリックスのリモデリングも調節します。BMP-7依存的なシグナル伝達はMAPKなどの状況依存的な経路とも交差し、細胞運命決定、増殖、分化を制御します。BMP-7活性の破綻は異常な発生表現型や線維化・炎症応答の変化と関連しており、そのためBmp7は疾患関連モデルにおける機序解析研究で頻繁に標的とされています。

BMP-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるBmp7遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Bmp7内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Bmp7のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、BMP-7タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、BMP-7シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Bmp7欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• BMP-7の機能に不可欠なBmp7エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Bmp7ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• BMP-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびBMP-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Bmp7遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  BMP-7 HDRプラスミド（m）および BMP-7 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはBmp7ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のBmp7標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。