BLOS1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406825-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BLOS1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase BLOS1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase BLOS1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para BLOC1S1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BLOS1 Anticorpo (E-4): sc-515444
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BLOS1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406825-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BLOS1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406825-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BLOC1S1 codifica a BLOS1, uma subunidade central do complexo 1 de biogênese de organelas relacionadas a lisossomos (BLOC-1), que coordena a triagem endossomal e o tráfego de membranas. A BLOS1 contribui para vias de entrega de carga e de reciclagem que influenciam a maturação de organelas relacionadas a lisossomos e a dinâmica de vesículas secretórias, vinculando-a à proteostase e à homeostase celular. Por seus papéis no transporte vesicular e na biogênese de organelas, o BLOC1S1 é estudado em vias relevantes para pigmentação, função de grânulos de células imunes e conectividade neuronal. A desregulação de redes de tráfego associadas ao BLOC-1 tem sido investigada no contexto de mecanismos de doenças do neurodesenvolvimento e neuropsiquiátricas, sustentando seu uso como um nó funcional em estudos de biologia celular.
BLOS1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus BLOC1S1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de BLOC1S1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função BLOC1S1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com BLOC1S1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.