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BIGM103慢病毒激活颗粒(m) | sc-426620-LAC | 200 µl | $455.00 |
Slc39a8 编码 ZIP8 金属离子转运体,介导细胞对锰、锌等二价阳离子的摄取,并有助于维持细胞内金属稳态。通过调控锰的可利用性,ZIP8 能影响锰依赖性酶的活性,包括糖基化通路以及更广泛的代谢与氧化还原过程,从而塑造细胞的应激反应。文献报道 SLC39A8/ZIP8 功能异常与炎症信号传导、神经发育表型及代谢性状相关,这与微量营养素转运在组织生理中的核心作用相一致。因此,在小鼠体系中,Slc39a8 是研究金属依赖性信号调控与基因表达程序(并与疾病相关机制相联系)的一个有用关键节点。
BIGM103 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Slc39a8 表达。
BIGM103 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Slc39a8转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性BIGM103表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Slc39a8 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。