BIGM103 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426620
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BIGM103 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico BIGM103, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BIGM103 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-426620 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Slc39a8 codifica um transportador de íons metálicos da família ZIP (BIGM103) que medeia principalmente a captação celular de cátions divalentes, com forte ênfase na homeostase do manganês. Ao controlar a disponibilidade intracelular de Mn, a SLC39A8 influencia a atividade de enzimas dependentes de Mn e sustenta processos como glicosilação, metabolismo mitocondrial e equilíbrio redox. Alterações na função da SLC39A8 têm sido associadas a desregulação no manejo de metais e a efeitos a jusante na sinalização inflamatória e em vias metabólicas, tornando-a relevante para o estudo de interações nutriente–gene e de fenótipos celulares responsivos ao estresse. Em sistemas murinos, Slc39a8 é frequentemente investigado no contexto da biologia de transportadores, respostas imunes inatas e características relacionadas ao metabolismo.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO BIGM103 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Slc39a8 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Slc39a8, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Slc39a8 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína BIGM103.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Slc39a8 para a investigação da sinalização de BIGM103, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Slc39a8 críticos para a função BIGM103
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Slc39a8 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo BIGM103 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo BIGM103 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Slc39a8. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo BIGM103 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR BIGM103 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Slc39a8 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Slc39a8 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.