beta-catenin Lentiviral Activation Particles (m): sc-419477-LAC

Das Mausgen **Ctnnb1** codiert **Beta-Catenin**, ein multifunktionales Protein, das **cadherinvermittelte Zell-Zell-Adhäsion** mit Transkriptionsprogrammen koppelt, die durch die **kanonische Wnt-Signalgebung** gesteuert werden. In Abwesenheit von Wnt-Liganden wird Beta-Catenin durch den **APC–AXIN–GSK3-Destruktionskomplex** zur Phosphorylierung und zum Abbau markiert; bei Aktivierung des Signalwegs wird Beta-Catenin dagegen stabilisiert und seine nukleäre Assoziation mit **TCF/LEF-Transkriptionsfaktoren** gefördert. Über diesen Schalter reguliert **Ctnnb1** die embryonale Musterbildung, die Aufrechterhaltung von Stamm- und Vorläuferzellen, die epitheliale Homöostase sowie die Differenzierung. Fehlregulierte Beta-Catenin-Signalgebung und veränderte Dynamiken von **Adherens Junctions** sind breit mit onkogener Transformation, invasiven Phänotypen und Entwicklungsdefekten verknüpft, wodurch **Ctnnb1** einen zentralen Knoten in signalwegfokussierten Krankheitsmodellen darstellt.

beta-catenin Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Ctnnb1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

beta-catenin Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Ctnnb1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen beta-catenin-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Ctnnb1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.