非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
Bcl-w双切口酶质粒(h): sc-402639-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Bcl-w 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Bcl-w双切酶质粒（h）和Bcl-w双切酶质粒（h2）编码针对BCL2L2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Bcl-w: sc-293236，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Bcl-w双切口酶质粒(h) | sc-402639-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Bcl-w双切口酶质粒(h2) | sc-402639-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BCL2L2 编码抗凋亡的 Bcl-2 家族蛋白 Bcl-w。Bcl-w 位于线粒体外膜，是内源性凋亡通路的调控因子：它通过拮抗促凋亡的 BH3-only 蛋白并限制 BAX/BAK 孔道形成，从而抑制细胞色素 c 的释放。通过维持线粒体完整性，Bcl-w 影响半胱天冬酶（caspase）激活阈值，并整合来自细胞应激反应、生长因子缺乏和代谢扰动等下游的存活信号。BCL2L2 表达异常与肿瘤生物学中细胞存活程序失调有关；同时也在神经元存活与生殖细胞维持等情境中被研究，因为对凋亡的敏感性会塑造组织稳态。这些功能使 BCL2L2 成为解析线粒体凋亡线路、应激适应以及与 MAPK 和 PI3K–AKT 信号通路交叉调控的有用靶点。
Bcl-w 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 BCL2L2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对BCL2L2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏BCL2L2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了BCL2L2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。