Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
BCAS2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426956
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- BCAS2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico BCAS2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: BCAS2 Anticuerpo (F-5): sc-376554
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
BCAS2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-426956 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Bcas2 codifica BCAS2, un componente evolutivamente conservado del complejo espliceosomal asociado a Prp19 que favorece el empalme (splicing) del pre-ARNm y la selección de sitios de empalme. BCAS2 también se relaciona con la regulación transcripcional y las vías de mantenimiento del genoma, y se ha vinculado con la progresión del ciclo celular mediante la modulación de la señalización de los puntos de control y de la respuesta al daño del ADN. En sistemas murinos, la alteración de BCAS2 puede modificar programas de empalme alternativo y redes posteriores de expresión génica que influyen en la proliferación, la diferenciación y las respuestas al estrés. La expresión desregulada de BCAS2 o defectos de empalme que involucren complejos asociados a BCAS2 se han estudiado en el contexto de la biología tumoral y otros trastornos en los que el procesamiento aberrante del ARN contribuye a los mecanismos de la enfermedad.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO BCAS2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Bcas2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Bcas2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Bcas2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína BCAS2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Bcas2 para la investigación de la señalización de BCAS2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Bcas2 críticos para la función de BCAS2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Bcas2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido BCAS2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido BCAS2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Bcas2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR BCAS2 (m) y el plásmido HDR BCAS2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Bcas2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Bcas2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.