BCAM Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405080-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BCAMO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase BCAM (h) e o Plasmídeo Double Nickase BCAM (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para BCAM. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BCAM Anticorpo (D-6): sc-365191
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BCAM Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405080-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BCAM Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405080-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BCAM (molécula de adesão de células basais), também conhecida como glicoproteína do grupo sanguíneo Lutheran, é um membro da superfamília das imunoglobulinas presente na superfície celular que medeia a adesão à laminina α5 nas membranas basais. Por meio de interações com a matriz extracelular e adaptadores do citoesqueleto, a BCAM influencia a adesão célula–matriz, a migração e a sinalização mecânica que molda a organização epitelial e endotelial. Sua expressão e seu estado de glicosilação podem modular o tráfego vascular e de células inflamatórias e contribuir para alterações dependentes do contexto na integridade tecidual. Alterações na atividade da BCAM têm sido estudadas em relação a fenômenos de adesão de hemácias, à invasividade de células tumorais e à remodelação do microambiente, relevantes para a biologia de neoplasias hematológicas e de tumores sólidos.
BCAM O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus BCAM em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de BCAM. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função BCAM. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com BCAM interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.