B7RP-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406855

Übersicht

ICOSLG kodiert den induzierbaren T‑Zell‑Kostimulator‑Liganden (B7RP‑1), ein Immun-Checkpoint-Molekül der B7‑Familie, das von antigenpräsentierenden Zellen sowie stromalen Kompartimenten exprimiert wird und an ICOS auf aktivierten T‑Zellen bindet. Diese Interaktion fördert kostimulatorische Signale, die Proliferation, Überleben und Zytokinprogramme von T‑Zellen unterstützen, und prägt damit Keimzentrumsreaktionen, die Differenzierung T‑follikulärer Helferzellen sowie klassengewechselte Antikörperantworten. Die ICOSLG–ICOS‑Signalgebung überschneidet sich mit PI3K‑AKT‑abhängigen Signalwegen und moduliert die Wechselwirkungen zwischen angeborenen und adaptiven Immunzellen in entzündeten Geweben und Tumormikroumgebungen. Eine fehlregulierte ICOSLG‑Expression oder -Signalgebung wurde mit autoimmuner Entzündung, allergischen Erkrankungen, der Transplantationsimmunbiologie sowie Mechanismen der Immunflucht in Zusammenhang gebracht, die für die Krebs- und Chronische‑Infektionsforschung relevant sind.

Das B7RP-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des ICOSLG-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des ICOSLG-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von ICOSLG nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die B7RP-1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von ICOSLG-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der B7RP-1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf ICOSLG-Exone abzielen, die für die B7RP-1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere ICOSLG-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom B7RP-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom B7RP-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des ICOSLG-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das B7RP-1 HDR-Plasmid (h) und B7RP-1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von ICOSLG-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten ICOSLG-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.