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B-Myb慢病毒激活颗粒(h2) | sc-401318-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
人类MYBL2基因编码转录因子B-Myb,它属于Myb家族调控因子,通过控制G1/S期转换、DNA复制以及有丝分裂进入所必需基因的表达来协调细胞周期进程。B-Myb在DREAM–MMB调控轴中发挥作用,并与E2F及由细胞周期蛋白/CDK驱动的信号通路协同,调节与染色质相关的转录程序并维持基因组稳定性。MYBL2活性失调常与细胞增殖表型相关,并在多种肿瘤背景下与致癌性转录特征相联系,因此是研究细胞周期控制与转录重编程的一个重要分子枢纽。对MYBL2进行基因编辑有助于在人体细胞模型中机制性解析增殖检查点、复制压力应答以及转录因子依赖性图谱的建立。
B-Myb 慢病毒激活颗粒(h2)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 MYBL2 表达。
B-Myb 慢病毒激活颗粒(h2)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在MYBL2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性B-Myb表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 MYBL2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。