AVP Receptor V2 Double Nickase Plasmid (h): sc-403177-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das AVP Receptor V2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- AVP Receptor V2 Double-Nickase-Plasmid (h) und AVP Receptor V2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf AVPR2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
AVP Receptor V2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-403177-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
AVP Receptor V2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-403177-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AVPR2 kodiert den Vasopressin‑V2‑Rezeptor (AVP‑Rezeptor V2), einen G‑Protein‑gekoppelten Rezeptor, der überwiegend an Gs gekoppelt ist und nach Bindung von Arginin‑Vasopressin den intrazellulären cAMP‑Spiegel erhöht. Dieses Signal aktiviert PKA‑abhängige Signalwege, die Membrantransportprozesse und Programme der Wasserresorption regulieren, einschließlich der Kontrolle der Aquaporin‑2‑Lokalisierung in epithelialen Systemen. Die Funktion von AVPR2 verknüpft die endokrine Osmoregulation mit zellulärer Second‑Messenger‑Signalübertragung sowie mit Prozessen der Rezeptordesensibilisierung und ‑internalisierung. Fehlregulationen oder Loss‑of‑Function‑Varianten in AVPR2 sind mit einer beeinträchtigten Vasopressin‑Antwort assoziiert und werden häufig bei Störungen des Wasserhaushalts und Defekten der GPCR‑Signalübertragung untersucht.
AVP Receptor V2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des AVPR2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von AVPR2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die AVPR2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit AVPR2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.