ATP7A CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419259

개요

Atp7a는 P형 ATPase 구리 수송체인 ATP7A를 암호화하며, 구리 농도에 반응해 trans-골지 네트워크와 세포막 사이를 오가며 세포 내 구리 분포를 조절합니다. ATP7A는 분비 경로 효소에 구리를 공급하고 구리의 세포 외 배출을 촉진함으로써, 구리 의존적 효소의 성숙을 통한 산화 스트레스 조절, 세포외기질 가교 형성, 철 항상성 유지 등 구리 의존적 과정들을 뒷받침합니다. ATP7A의 기능은 소포체 수송, 금속 이온 항상성, 산화환원 신호전달 경로와 교차하며, 기능 이상은 전신 및 세포 수준의 구리 균형을 교란합니다. 마우스 모델에서는 Atp7a 기능 변화를 이용해 구리 의존적 신경발달 및 결합조직 관련 표현형의 기전과 더 광범위한 대사 스트레스 반응을 연구합니다.

ATP7A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Atp7a 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Atp7a 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Atp7a의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ATP7A 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ATP7A 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Atp7a 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ATP7A 기능에 중요한 Atp7a 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Atp7a 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ATP7A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 ATP7A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Atp7a 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ATP7A HDR 플라스미드 (m) 및 ATP7A HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Atp7a 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Atp7a 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.