ATP11B Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-411692-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ATP11BO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ATP11B (h) e o Plasmídeo Double Nickase ATP11B (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ATP11B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ATP11B Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-411692-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ATP11B Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-411692-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATP11B codifica uma flippase de fosfolípidos P4-ATPase que ajuda a manter a assimetria lipídica da membrana ao translocar aminofosfolípidos através das bicamadas, apoiando a formação de vesículas, o tráfego de membranas e a homeostase de organelos. Por meio do seu papel em processos de transporte associados a endossomas e ao complexo de Golgi, a ATP11B contribui para vias de triagem e reciclagem que influenciam a localização de recetores e a sinalização intracelular. A perturbação da dinâmica de translocação lipídica pode alterar a polaridade celular, as respostas ao stress e o transporte dependente de membranas, tornando a ATP11B relevante para estudos de proteostase e de fenótipos ligados ao tráfego. Alterações na expressão ou na função da ATP11B têm sido associadas na literatura a mudanças no transporte/manuseamento de fármacos e na tolerância ao stress celular, motivando investigações mecanísticas em biologia do cancro e em modelos de quimiorresistência.
ATP11B O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ATP11B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ATP11B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ATP11B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ATP11B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.