ATF-5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-430721
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ATF-5 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ATF-5, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ATF-5 Anticorpo (E-10): sc-377168
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ATF-5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-430721 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O fator de transcrição ativador 5 (ATF-5), codificado pelo gene Atf5 de camundongo, é um fator de transcrição do tipo zíper de leucina básico (bZIP) que regula programas de expressão gênica que controlam a adaptação ao estresse celular, a diferenciação e a sobrevivência. O ATF-5 participa da sinalização da resposta integrada ao estresse e pode acoplar sinais a montante associados a eIF2α/ATF4 a saídas transcricionais que influenciam a função mitocondrial e a proteostase. No sistema nervoso e em outros tecidos em desenvolvimento, o ATF-5 tem sido associado a decisões de linhagem e à manutenção de estados proliferativos ou semelhantes a progenitores por meio de controle transcricional dependente do contexto. A atividade desregulada de ATF-5 tem sido associada a tolerância anômala ao estresse e a alterações em vias de sobrevivência celular, reforçando sua relevância para estudos mecanísticos do remodelamento, relacionado a doenças, de redes transcricionais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ATF-5 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Atf5 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Atf5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Atf5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ATF-5.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Atf5 para a investigação da sinalização de ATF-5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Atf5 críticos para a função ATF-5
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Atf5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ATF-5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ATF-5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Atf5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ATF-5 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ATF-5 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Atf5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Atf5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.