ATAD1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-413720
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- ATAD1 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在ATAD1基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
订购信息
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ATAD1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-413720 | 20 µg | $397.00 |
概述
ATAD1（ATPase family AAA domain containing 1）是一种定位于线粒体外膜的 AAA+ ATPase，通过将错误定位或受损的尾锚定（tail-anchored）蛋白从膜上抽提出并清除，在蛋白质质量控制中发挥作用。借助其 ATP 依赖性的解离/转位酶（dislocase）活性，ATAD1 维持线粒体稳态、与泛素–蛋白酶体通路协同，并影响细胞器应激反应，从而作用于细胞代谢与存活。ATAD1 依赖的膜蛋白监视机制一旦受到扰动，可能改变线粒体动力学与蛋白质稳态；这些过程常在线粒体相关的神经退行性疾病、代谢失衡以及癌症相关的线粒体重塑研究中被关注。作为线粒体蛋白周转的调控因子，ATAD1 是一个有用的切入点，可用于探究细胞器质量控制如何与凋亡信号及细胞应激适应相互交叉。
ATAD1 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中ATAD1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对ATAD1基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏ATAD1开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使ATAD1蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建ATAD1缺失的细胞模型，用于ATAD1信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 ATAD1 功能至关重要的 ATAD1 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 ATAD1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 ATAD1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 ATAD1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 ATAD1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 ATAD1 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 ATAD1 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由ATAD1同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定ATAD1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。