ASIC2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403265-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ASIC2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ASIC2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ASIC2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ASIC2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ASIC2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403265-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ASIC2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403265-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ASIC2 (subunidade 2 do canal iônico sensível a ácido) codifica um canal de cátions da família DEG/ENaC, ativado por prótons e sensível à amilorida, que contribui para a excitabilidade neuronal e a despolarização de membrana em resposta à acidificação extracelular. Em células humanas, o ASIC2 pode se montar com outras subunidades ASIC para ajustar a seletividade iônica, a cinética de dessensibilização e a sensibilidade ao pH, conectando mudanças locais de pH ao influxo de Ca2+/Na+ e à sinalização a jusante. A atividade do ASIC2 se cruza com processos como transmissão sináptica, mecanossensação e percepção de microambientes inflamatórios, nos quais o pH extracelular flutua. Alterações na expressão do ASIC2 ou na função do canal têm sido investigadas em neurofisiologia e na sinalização relacionada à dor, sendo relevantes para pesquisas sobre respostas neuronais ao estresse e vias de excitotoxicidade.
ASIC2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ASIC2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ASIC2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ASIC2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ASIC2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.