ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400429-NIC

ASGR1 codifica a principal subunidade do receptor hepático de asialoglicoproteínas (ASGPR1), uma lectina do tipo C expressa predominantemente na superfície dos hepatócitos, que reconhece glicoproteínas dessialiladas com galactose terminal ou N-acetilgalactosamina. Após a ligação ao ligante, o ASGPR1 medeia a endocitose dependente de clatrina e o tráfego para compartimentos endo-lisossomais, contribuindo para a depuração de glicoproteínas e para a regulação homeostática de proteínas circulantes. Esse receptor participa de processos de reconhecimento de carboidratos e de transporte vesicular que se cruzam com vias metabólicas específicas do fígado e com a dinâmica de reciclagem de receptores. Alterações na função ou na expressão de ASGR1 são frequentemente investigadas em contextos de disfunção hepática e metabolismo lipídico, o que o torna um alvo relevante para estudos mecanísticos em biologia do fígado.

ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ASGR1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ASGR1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ASGR1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ASGR1 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.