ARMCX3 Double Nickaseプラスミド (h): sc-409945-NIC

ARMCX3（armadillo repeat containing, X-linked 3）は、ミトコンドリア外膜に関連するタンパク質をコードしており、神経発生およびオルガネラ恒常性に関与するとされています。ARMCX3は、ミトコンドリアの輸送、ダイナミクス、品質管理の制御に関与し、これらの過程は細胞のエネルギー代謝（バイオエナジェティクス）やストレスシグナルに影響を与えます。こうした機能を通じてARMCX3は、ミトコンドリアの分布と細胞の生存・分化プログラムを結び付ける経路に関与しており、ミトコンドリアの挙動異常が神経変性やがん関連の表現型に寄与する状況とも関連します。ARMCX3の発現や機能の異常は、増殖、アポトーシス感受性、ならびに遊走関連シグナルの変化と関連づけられており、ヒト細胞におけるミトコンドリア制御機構を解明するための有用な研究対象となります。

ARMCX3 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における ARMCX3 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、ARMCX3内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、ARMCX3の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。

編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、ARMCX3が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。