ARID1A Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-430047-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ARID1AO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ARID1A (m) e o Plasmídeo Double Nickase ARID1A (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Arid1a. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ARID1A Anticorpo (PSG3): sc-32761
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ARID1A Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-430047-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ARID1A Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-430047-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **Arid1a** de camundongo codifica a **ARID1A**, uma subunidade de ligação ao DNA do complexo de remodelamento de cromatina **SWI/SNF (BAF)** dependente de ATP, que modula o posicionamento dos nucleossomos para regular programas transcricionais. A ARID1A ajuda a coordenar a acessibilidade de enhancers e promotores, influenciando o controle do ciclo celular, a especificação de linhagem, as respostas a danos no DNA e a estabilidade do genoma por meio de efeitos amplos na arquitetura da cromatina. Em sistemas de mamíferos, a função alterada de ARID1A está fortemente associada à desregulação do controle epigenético e à diferenciação prejudicada, tornando-a um nó-chave para estudar alterações na proliferação e na sinalização de resposta ao estresse mediadas pela cromatina. Assim, **Arid1a** é amplamente utilizado em modelos murinos para investigar vias de remodelamento de cromatina e seus papéis em fenótipos celulares relevantes para doenças.
ARID1A O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Arid1a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Arid1a. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Arid1a. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Arid1a interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.