ARH2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-410510-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ARH2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ARH2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ARH2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ADPRHL1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ARH2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-410510-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ARH2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-410510-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADPRHL1 codifica a ARH2, um membro da família das ADP-ribosil-hidrolases, implicada na reversão da mono-ADP-ribosilação, uma modificação pós-traducional que influencia a degradação/renovação de proteínas, a transdução de sinal e as respostas ao stress celular. Ao regular o metabolismo da ADP-ribose, a ARH2 pode afetar vias ligadas às respostas a danos no DNA e à proteostase, processos frequentemente reprogramados em estados patológicos. Em tecidos humanos, a expressão de ADPRHL1 tem sido associada à biologia muscular e cardíaca, apoiando a investigação de como a dinâmica da ADP-ribosilação contribui para a função mitocondrial e para a homeostase de células contráteis. A desregulação da sinalização dependente de ADP-ribose é amplamente relevante para fenótipos inflamatórios e degenerativos, tornando a ARH2 um nó útil para estudos mecanísticos de sobrevivência celular e adaptação ao stress.
ARH2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ADPRHL1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ADPRHL1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ADPRHL1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ADPRHL1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.