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Apolipoprotein A I/APOA1双切口酶质粒(h) | sc-400499-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Apolipoprotein A I/APOA1双切口酶质粒(h2) | sc-400499-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 APOA1 基因编码载脂蛋白 A-I(apolipoprotein A-I),它是高密度脂蛋白(HDL)颗粒的主要蛋白质成分,也是逆向胆固醇转运的关键介导因子。APOA1 与 ABCA1 和 ABCG1 相互作用,促进细胞胆固醇与磷脂外排,推动新生 HDL 的生成,并支持依赖卵磷脂-胆固醇酰基转移酶(LCAT)的 HDL 成熟。通过这些过程,APOA1 影响脂质稳态、巨噬细胞泡沫化,以及在血管和肝脏环境中的炎症信号传导。APOA1 的表达或功能异常与血脂异常及动脉粥样硬化相关表型有关,因此它是研究脂蛋白代谢机制的重要靶点。
Apolipoprotein A I/APOA1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 APOA1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对APOA1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏APOA1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了APOA1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。