APC8 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406761

개요

CDC23는 후기촉진복합체/사이클로솜(APC/C)의 핵심 소단위체인 APC8을 암호화합니다. APC/C는 E3 유비퀴틴 리가아제로, 세큐린(securin)과 사이클린 등 핵심 조절 인자를 프로테아좀 분해로 유도함으로써 유사분열 진행과 세포주기 종료를 조율합니다. APC8은 APC/C의 조립과 기질 인식에 기여하며, 체크포인트 신호를 통합해 자매 염색분체가 정확히 분리되도록 하고 게놈 안정성을 유지합니다. 유비퀴틴 매개 단백질 분해에서의 역할을 통해 CDC23는 방추체 체크포인트 조절, 유사분열 타이밍, 그리고 G2/M 및 후기(anaphase)로의 질서 있는 전환을 관장하는 경로들과 연결됩니다. APC/C 구성 요소와 관련 세포주기 조절 메커니즘의 이상은 증식성 질환 및 이수성(aneuploidy) 관련 표현형과 자주 연관되므로, CDC23/APC8은 세포분열 결함의 기전을 연구하는 데 중요한 표적입니다.

APC8 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CDC23 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CDC23 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CDC23의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 APC8 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 APC8 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CDC23 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• APC8 기능에 중요한 CDC23 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CDC23 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• APC8 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 APC8 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CDC23 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  APC8 HDR 플라스미드 (h) 및 APC8 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CDC23 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CDC23 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.